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DNA loading buffer
10×
Loading
buffer
和6×Loading buffer的区别
答:
6×
Loading
buffer
:30mM EDTA 36%(v/v) Glycerol 0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF 0.05%(w/v) Bromophenol Blue 主要用于
DNA
电泳 10×Loading buffer:30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF 0.25%(w/v) Bromophenol Blue 主要用于RNA电泳 ...
做PCR时MasterMix是什么意思啊
答:
做PCR时MasterMix是指反应混合物,即PCR试验时使用的预混物。MasterMix的配制:一般PCR的MasterMix都是两倍的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。MasterMix的配置过程中,需要注意:1、MasterMix不要反复冻融,如果经常使用,最好溶解后放在4度。2、更多的配制MasterMix 进行,减少加样误差。最好能在...
蛋白用
loading
煮多久
答:
从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔。有的
Buffer
是加有SDS的,一般都会写明。SDS主要是促使聚合酶变性,因为没有除尽的聚合酶会结合在
DNA
双链上影响它的迁移速率。细胞裂解后的裂解液,加
loading
100℃加热,也是为了中止酶促反应,防止提取的蛋白质降解。以上内容参考:百度百科-loading
buffer
...
纯化
dna
的方法有哪些
答:
纯化
DNA
的常用方法是用酚抽提-乙醇沉淀法,适用于普通实验室操作。它通过交替使用苯酚、氯仿两种不同的蛋白质变性剂,可以增加去除蛋白质杂质的效果;氯仿可以去除核酸溶液中的微量酚,还可以加快有机相与液相混合,去除色素和蔗糖;在氯仿中加入少量的异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。【实验...
...要稀释吗?包装量为:450ng/5ul 已经有1*
Loading
Buffer
的
DNA
...
答:
Marker不需要稀释,只是做参照条带用,用500的Marker在你所认为比较容易做参照的泳道,一般点3ul就足够了
DNA
纯化的方法?
答:
G.加入500ml Wash
Buffer
,8000rpm离心1分钟,过滤液倒掉.H.14000rpm离心2分钟.I.将DF Column转移至上另一乾净的微量离心管.加入15ml Elution Buffer,室温静置2分钟.J.14000rpm离心2分钟,微量离心管内之液体即为纯化的
DNA
片段.K.取0.5ml纯化的DNA加入4.5mlDDW及1ml 6x DNA
loading
dye,跑0.7%琼胶...
SDS碱裂解法制备质粒
DNA
的具体操作步骤是怎么样的?那位大侠给力点,帮...
答:
9.RNase A(RNA酶A):不含
DNA
酶(DNase-free) RNase A的10mg/ml,TE配制,沸水加热15min,分装后贮存于-20℃。10. 6×
loading
buffer
(上样缓冲液):0.25%溴酚蓝,0.25%二甲苯青FF,40%(W/V)蔗糖水溶液。11. 1% 琼脂糖凝胶:称取1g琼脂糖于三角烧瓶中,加100ml 0.5×TBE,微波炉...
我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克
DNA
,用电泳跑完了,不知道应该...
答:
点5ulMARKer(其实最好用超螺旋Marker),1ul 质粒(松弛型,如果是严谨性质粒浓度比较低要多点几ul)。电泳后比较条带亮度,如果和4kb条带一样亮则为100ng/ul, 如果和其他条带一样亮为50ng/ul
酶切产物电泳检测无条带这是怎么回事?
答:
1、我不建议酶用1ul,商品化的酶都是浓缩酶,0.1-0.2就足够。太多的酶可能会有星活性。2、如果
DNA
提取质量高,没有蛋白污染,那么过夜没问题,否则也不建议超长时间酶切;3、用多少质粒不是看体积,只要100ng就看得见,先定量质粒。做双酶切,如果2个片段都不太小,那么用200ng的质粒保证可以...
100bp的
DNA
电泳时
loading
buffer
的用量是多少?
答:
跑胶时
loading
buffer
加百分之20。电泳时loading buffer和样品
DNA
比例是5:1。即向5份DNA溶液中加入一份6×
Loading
Dye。例如:向10ul DNA Ladder中加入2ul 6×Loading Dye。loading buffer的功能:(1)里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯氰FF起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳。(2)...
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